Comment faire du BDA (gélose pomme de terre-dextrose)

Auteur: Joan Hall
Date De Création: 6 Janvier 2021
Date De Mise À Jour: 26 Novembre 2024
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Comment faire du BDA (gélose pomme de terre-dextrose) - Des Articles
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L'agar dextrose de pomme de terre (BDA) est un bon milieu semi-solide polyvalent utilisé pour créer des champignons. Il est également souvent utilisé pour isoler, cultiver et maintenir les espèces de champignons en formation. Des boîtes de Pétri ou des tubes contenant du BDA peuvent être achetés, ou le BDA peut être préparé rapidement à l’aide d’un prémélange commercial. Cependant, il n’est pas difficile de réaliser une version simple et efficace à faible coût.


Les instructions

Pomme de terre (Zedcor à part entière / PhotoObjects.net / Getty Images)

    Préparer l'extrait de pomme de terre

  1. Mettez les pommes de terre dans une casserole avec environ 1,2 litre d'eau du robinet et laissez mijoter sur une cuisinière pendant une heure.

  2. Retirer la casserole du feu et refroidir le liquide jusqu'à ce qu'il puisse être manipulé confortablement (environ dix minutes).

  3. Versez l'extrait liquide de pomme de terre à travers un filtre ou une gaze et ramassez-le dans un autre récipient.

    Préparer le mélange

  1. Ajouter le dextrose et la gélose à une pinte d’eau d’extrait de pomme de terre.

  2. Testez le pH de la solution avec un testeur de pH ou un pH-mètre.


  3. Si le pH est supérieur à 6,5, diminuez-le en ajoutant une goutte de solution d'acide chlorhydrique à chaque fois et en effectuant un autre test.

  4. Si le pH est inférieur à 6, ajustez-le en ajoutant une goutte de solution d'hydroxyde de sodium à la fois et en effectuant un nouveau test.

    Stérilisation

  1. Bien mélanger et diviser en lots plus petits de 250 millilitres. Verser dans quatre flacons de 500 ml (chaque flacon doit être à moitié plein pour ne pas faire bouillir).

  2. Chargez chaque flacon avec un morceau de papier d’aluminium plié à volonté pour que le film ne tombe pas, mais ne scellez pas complètement non plus.

  3. Mettez les pots dans un autocuiseur.

  4. Faites fonctionner l’autocuiseur conformément aux instructions du fabricant pour stériliser le BDA à 121 ° C à 15 psi pendant 15 minutes.


  5. Eteignez l'autocuiseur et laissez-le revenir à la pression atmosphérique, puis retirez les flacons et laissez-les refroidir jusqu'à ce qu'ils puissent être manipulés.

    Verser le mélange

  1. Alignez les boîtes de Pétri sur une surface plane.

  2. Une fois que les flacons ont été refroidis à la température de manipulation mais avant que le milieu ne commence à se solidifier, tenez le flacon avec une main et retirez le couvercle en aluminium avec l'autre main.

  3. Pour chaque boîte de Pétri, retirez le couvercle d'une main, remplissez rapidement la moitié de BDA liquide et replacez le couvercle.

  4. Répétez l'étape 3 ci-dessus jusqu'à ce que toutes les boîtes de Pétri soient remplies.

  5. S'il reste du BDA, récupérez le flacon avec le couvercle en aluminium d'origine, laissez-le refroidir et solidifiez-le, resserrez le couvercle en aluminium et conservez-le au réfrigérateur.

Comment

  • La plupart des champignons poussent bien dans des conditions légèrement acides, de sorte que le pH final doit être compris entre 6 et 6,5, bien qu'il puisse être ajusté à tout pH requis pour une espèce spécifique.
  • Laisser les couvercles de la boîte de Pétri s'ouvrir suffisamment pour permettre de verser le mélange et de le recouvrir aussi vite que possible.
  • Il faut de la pratique pour gagner en rapidité et en efficacité lors du déversement de gélose dans des boîtes de Pétri.
  • Après refroidissement et solidification, les plats BDA peuvent être emballés dans du plastique et conservés au réfrigérateur pendant des mois.
  • La plupart de l'eau du robinet contient des minéraux bénéfiques pour la croissance des champignons. Toutefois, si l'eau locale a des concentrations de minéraux extrêmes ou un pH très élevé ou bas, remplacez-la par de l'eau distillée.

Avis

  • Suivez toutes les instructions de fonctionnement et de sécurité relatives à l'autocuiseur à utiliser.
  • Laissez les bouchons des bouteilles desserrés lors de la stérilisation de l’autocuiseur afin d’éviter toute surpression.
  • Porter des gants résistant à la chaleur lors de la manipulation de conteneurs chauds.
  • Portez des lunettes de sécurité lors de l'utilisation de l'autocuiseur lors du retrait du BDA stérile et pendant la coulée.

Ce dont vous avez besoin

  • 300 g de pommes de terre pelées et coupées
  • Pan
  • Passoire de cuisine
  • Testeur de pH ou pH mètre
  • 1 molaire d'acide chlorhydrique
  • 1 molaire d'hydroxyde de sodium
  • 4 flacons de verre Ehrlenmayer de 500 ml (ou autres récipients à passage étroit autoclavables)
  • 10 g de dextrose (glucose) en poudre
  • 20 g d'agar
  • Feuille d'aluminium
  • Autocuiseur
  • Boîtes de Pétri stériles